VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 1 IMPACTODELADEGRADACIÓNAMBIENTALYLOSFALSOSPOSITIVOSQUÍMICOSENLAVALIDEZFORENSEDELASPRUEBASPRESUNTIVASPARASANGRE:UNAREVISIÓNSISTEMÁTICAIMPACTOFENVIRONMENTALDEGRADATIONANDCHEMICALFALSEPOSITIVESONTHEFORENSICVALIDITYOFPRESUMPTIVEBLOODTESTS:ASYSTEMATICREVIEWElianadelConsuelodelaTorreNúñez1,FreddyAdolfoSánchezPolit2,VerónicaPaulinaCáceresManzano3,JoséLuisErazoParra4{eliana.delatorre@ueb.edu.ec1,freddy.sanchez@ueb.edu.ec2,vcaceres@unach.edu.ec3,jlerazo@unach.edu.ec4}Fechaderecepción:07/01/2026/Fechadeaceptación:02/03/2026/Fechadepublicación:10/03/2026RESUMEN:Evaluarsistemáticamenteelimpactodeladegradaciónambientalylosfalsospositivosquímicossobrelavalidezforensedelaspruebaspresuntivasparadeteccióndesangremedianteanálisiscríticodelaliteraturacientíficareciente.SerealizóunarevisiónsistemáticasiguiendodirectricesPRISMA2020,analizando73estudiospublicadosentre2019-2024identificadosmediantebúsquedaensietebasesdedatosespecializadas(PubMed,Scopus,WebofScience,SciELO,Redalyc,GoogleScholaryrepositoriosinstitucionales).LacalidadmetodológicaseevaluóconherramientasQUADAS-2,Newcastle-OttawayAMSTAR2.ElluminolylapruebadeKastle-Meyerexhibensensibilidadessuperioresal93%,conlímitesdedetecciónenrangosde1:100,000y1:16,384respectivamente,aunquesuespecificidadesmoderada(72.6%y84.3%).Lasprincipalesfuentesdeinterferenciaidentificadasincluyenagentesblanqueadores(90-100%defalsospositivos),metalesoxidantes(85-95%)yperoxidasasvegetales(60-88%).Latemperaturaresultaserelfactorambientalmáscrítico:a37°C,elmaterialgenéticosedegradasustancialmenteen28días,mientrasquea-20°Claestabilidadseextiendehasta365días.Lahumedadsuperioral85%precipitadegradacióncatalíticaenapenas14días.Elanálisisde19casosjudicialesdocumentadosrevelóqueel26.3%depruebaspresuntivaspositivasfueroncontradichasporanálisisconfirmatorios,conmayorfrecuenciadefalsospositivosenescenasexteriores(31.6%)versusinteriores(15.8%). 1DocenteCarreradeCriminalística,UniversidadEstataldeBolívar(UEB),PersonaldeapoyoAcadémico,UniversidadNacionaldeChimborazo(UNACH),Ecuador,https://orcid.org/0000-0001-8458-6632;+5930992788817.2DocenteCarreradeCriminalística,UniversidadEstataldeBolívar(UEB),DocenteUniversidadNacionaldeChimborazo(UNACH),Ecuador,https://orcid.org/0009-0002-2569-9906;+59309975123543DocenteCarreradeLaboratorioClínicoyOdontología,UniversidadNacionaldeChimborazo,Ecuador,https://orcid.org/0000-0001-5710-5661;+59309982222084DocenteCarreradePsicologíaClínicayMedicina,UniversidadNacionaldeChimborazo,Ecuador,https://orcid.org/0000-0003-3149-6718;+5930969832889
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 2 Laspruebaspresuntivasmantienenaltasensibilidadcomoherramientasdescreeninginicial,aunquesuslimitacionesdeespecificidadysusceptibilidadadegradaciónambientalrequiereninterpretacióncuidadosaencontextosforenses.Seidentificannecesidadesurgentesdeinvestigaciónenvalidacióndemétodosalternativos(tecnologíasHSI,biosensores),estandarizacióndeprotocolosdeinterpretación,ydesarrollodealgoritmosprobabilísticosparavaloracióndeevidenciaencondicionesambientalesadversas.Palabrasclave:Pruebaspresuntivasdesangre,luminol,Kastle-Meyer,falsospositivosquímicos,degradaciónambiental,validezforenseABSTRACT:Tosystematicallyevaluatetheimpactofenvironmentaldegradationandchemicalfalsepositivesonforensicvalidityofpresumptivebloodteststhroughcriticalanalysisofrecentscientificliterature.AsystematicreviewwasconductedfollowingPRISMA2020guidelines,analyzing73studiespublishedbetween2019-2024identifiedthroughsearchesinsevenspecializeddatabases(PubMed,Scopus,WebofScience,SciELO,Redalyc,GoogleScholar,andinstitutionalrepositories).MethodologicalqualitywasassessedusingQUADAS-2,Newcastle-Ottawa,andAMSTAR2tools.LuminolandKastle-Meyertestsexhibitsensitivitiesexceeding93%,withdetectionlimitsinrangesof1:100,000and1:16,384respectively,althoughtheirspecificityismoderate(72.6%and84.3%).Maininterferencesourcesincludebleachingagents(90-100%falsepositives),oxidizingmetals(85-95%),andvegetableperoxidases(60-88%).Temperatureemergesasthemostcriticalenvironmentalfactor:at37°C,geneticmaterialdegradessubstantiallywithin28days,whereasat-20°Cstabilityextendsupto365days.Humidityabove85%precipitatescatalyticdegradationinmerely14days.Analysisof19documentedjudicialcasesrevealedthat26.3%ofpositivepresumptivetestswerecontradictedbyconfirmatoryanalyses,withhigherfalsepositivefrequencyinoutdoorscenes(31.6%)versusindoor(15.8%).Presumptivetestsmaintainhighsensitivityasinitialscreeningtools,althoughtheirspecificitylimitationsandsusceptibilitytoenvironmentaldegradationrequirecarefulinterpretationinforensiccontexts.Urgentresearchneedsareidentifiedinvalidationofalternativemethods(HSItechnologies,biosensors),standardizationofinterpretationprotocols,anddevelopmentofprobabilisticalgorithmsforevidenceevaluationunderadverseenvironmentalconditions.Keywords:Presumptivebloodtests,luminol,Kastle-Meyer,chemicalfalsepositives,environmentaldegradation,forensicvalidity
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 3 INTRODUCCIÓNLaidentificaciónforensedesangreconstituyeunodelospilaresfundamentalesenlainvestigacióncriminalcontemporánea,proporcionandoevidenciacrucialparalareconstruccióndeescenasdelcrimenylavinculacióndesospechososconeventosdelictivos.Laspruebaspresuntivasparaladeteccióndesangre,entrelasquedestacanelluminol,lafenolftaleína(pruebadeKastle-Meyer),laleucomalaquitaverdeyeltetrametilbencidina,hansidoempleadasdurantedécadascomoherramientasdeprimeralíneaenelanálisisforensedebidoasualtasensibilidad,rapidezderespuestaybajocostooperacional(1,2).Estaspruebassefundamentanenlacapacidadcatalíticadelgrupohemopresenteenlahemoglobinaparaoxidarcompuestoscromogénicosoquimioluminiscentesenpresenciadeperóxidodehidrógeno,generandocambioscolorimétricosoemisióndeluzcaracterísticos(3).Elluminol,descubiertoen1928,hasidoefectivamenteempleadodurantemásdecuatrodécadasparaladetecciónpresuntivademanchasdesangreocultasenescenasdelcrimen,siendoconsideradounodelosensayosmásimportantesyreconocidosenelcampodelascienciasforenses(4,5).Sucapacidadparadetectarsangrediluidahasta10.000vecesloconvierteenunaherramientaextraordinariamentesensibleparalocalizarevidenciabiológicainvisiblealojohumano(6).Porsuparte,lapruebadeKastle-Meyer,desarrolladaaprincipiosdelsigloXXporJosephHoeingKastleyposteriormentemodificadaporErichMeyeren1903,puededetectarsangrediluidahasta1:10.000partespormillónendiversossustratos,demostrandounasensibilidadexcepcionalencondicionesdecampo(7,8).Sinembargo,apesardesuampliautilizaciónyprobadaeficacia,estaspruebaspresuntivaspresentanunalimitacióncríticainherenteasunaturalezaquímica:laausenciadeespecificidadabsolutaparasangrehumana.Laproblemáticadelosfalsospositivosquímicosconstituyeundesafíopersistenteenlaprácticaforensemoderna,yaquenumerosassustanciaspuedengenerarreaccionespositivassinlapresenciarealdesangre(9,10).Estudiosrecienteshandocumentadoquemúltiplesagentesoxidantes,incluyendosalesdecobre,salesdeníquel,hipocloritodesodio,peroxidasasvegetalespresentesentomates,lentejasyotrasleguminosas,puedencatalizarlasmismasreaccionesquímicasqueelgrupohemo,generandoresultadosfalsamentepositivos(11,12).Estafaltadeespecificidadpuedeconducirainterpretacioneserróneasdelaevidencia,investigacionesmaldireccionadasy,encasosextremos,aerroresjudicialesconconsecuenciasdevastadorasparalosinvolucrados.
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 4 Unestudiocomprehensivorecienteanalizólastasasdefalsospositivos(13)examinósistemáticamentelastasasdefalsospositivosenpruebaspresuntivascomunesutilizadasparalaidentificacióndefluidosbiológicos,identificandovacíossignificativosenlaliteraturarespectoalasreaccionescruzadasobservadasconotrosmaterialesbiológicosenmuestrasforensescomúnmenteencontradas(13).Losinvestigadoresdemostraronquelaidentificacióndefluidosbiológicosenmuestrasforensesdependedepruebasquímicasybiológicasqueexhibendiversosgradosdefalsapositividad,yqueloscientíficosforensesfrecuentementereportanresultadosutilizandotérminoscomo"probable","posible"o"probable",sinsiemprepoderproporcionarsoporterobustoparaestasconclusiones.Ladegradaciónambientaldelasmuestrasdesangreañadeunacapaadicionaldecomplejidadaestaproblemática.Lascondicionesambientalesadversas,incluyendoexposiciónprolongadaaaltastemperaturas,humedadextrema,radiaciónultravioleta,contaminaciónquímica,actividadmicrobianayfactorestafonómicosdiversos,puedenalterarsignificativamentelacomposiciónquímicadelasmuestrassanguíneasymodificarsureactividadfrentealaspruebaspresuntivas(14,15).Lahemoglobina,proteínacentralenestasreacciones,essusceptibleaprocesosdedesnaturalización,oxidaciónydegradaciónproteolíticacuandolasmuestrassonexpuestasacondicionesambientalessubóptimasduranteperíodosprolongados(16).Estadegradaciónmolecularpuederesultarenunadisminucióndelasensibilidaddelaspruebas,generandofalsosnegativos,oparadójicamente,puedeaumentarlareactividadconsustanciasinterferentespresentesenelentorno,incrementandoasíelriesgodefalsospositivos.InvestigacionesrecientessobreladeteccióndesangrefrescamedianteluminolyanálisisdeADNdespuésdecaminarsobrediversossustratoshandemostradoqueesposibleobtenerADNforenseútildeescenasdelcrimeninclusocuandolasangrenopuedevisualizarsemediantequimioluminiscencia,loqueplanteainterrogantesadicionalessobrelasensibilidadyfiabilidaddelaspruebaspresuntivasencondicionesdecamporeales(17).Estudiosparaleloshandocumentadoquefactoresambientalesespecíficos,comoladegradacióndelADNenmuestrasdesangreexpuestasacondicionesclimáticasvariables,puedenafectarsignificativamentenosololarecuperacióndematerialgenéticosinotambiénlareactividaddelaspruebaspresuntivas(18,19).Lavalidezforensedelaevidenciasanguíneadependecríticamentedelaconfiabilidad,especificidadysensibilidaddelosmétodosdedetecciónempleados.Enuncontextojudicial,dondelaevidenciacientíficapuededeterminarlalibertadocondenadeunindividuo,esimperativoquelosmétodosanalíticosutilizadosseanrobustos,reproduciblesyesténadecuadamentevalidadosparaminimizarelriesgodeerroresdiagnósticos(20).Latasadefalsospositivosdel27.4%documentadaenpruebasdediagnósticorecientessubrayalamagnituddeestedesafíoylanecesidadurgentedemejorarlaprecisióndiagnósticaenaplicacionesforenses(21).
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 5 Apesardelaimportanciacríticadeestetema,existeunaescaseznotablederevisionessistemáticasqueintegrendemaneracomprehensivaelconocimientoactualsobreelimpactoconjuntodeladegradaciónambientalylosfalsospositivosquímicosenlavalidezdelaspruebaspresuntivasparasangre.Lamayoríadelosestudiosexistentesabordanestosfactoresdemaneraaislada,sinconsiderarsusinteraccionessinérgicasyefectosacumulativossobrelafiabilidaddelaevidenciaforense.Estalagunaenelconocimientocientíficodificultaeldesarrollodeprotocolosestandarizadosdeinterpretaciónderesultadosylimitalacapacidaddelosprofesionalesforensesparaevaluaradecuadamentelaconfiabilidaddelaevidenciasanguíneaendiferentescontextosambientales.Porlotanto,elobjetivoprincipaldelapresenterevisiónsistemáticaesanalizarcríticamentelaliteraturacientíficaactualparaevaluarelimpactodeladegradaciónambientalylosfalsospositivosquímicosenlavalidezforensedelaspruebaspresuntivasparaladeteccióndesangre.Específicamente,estainvestigaciónsepropone:(1)identificarycaracterizarsistemáticamentelosprincipalesfactoresambientalesqueafectanlaestabilidadyreactividaddelasmuestrassanguíneas;(2)compilaryanalizarexhaustivamentelassustanciasinterferentesquegeneranfalsospositivosenlaspruebaspresuntivasmásutilizadas;(3)evaluarelimpactodeladegradaciónambientalsobrelasensibilidadyespecificidaddeestaspruebas;(4)analizarlasimplicacionesdeestosfactoresparalavalidezjurídicadelaevidenciaforense;y(5)proporcionarrecomendacionesbasadasenevidenciaparamejorarlaconfiabilidaddeladetecciónpresuntivadesangreencontextosforensesdiversos.Estarevisiónsistemáticabuscacontribuiralfortalecimientodelacienciaforensemediantelasíntesiscríticadelconocimientodisponible,laidentificacióndevacíosenlainvestigaciónactualylaformulacióndedirectricesprácticasquepuedanserimplementadasporlaboratoriosforenses,investigadoresdeescenasdelcrimenyprofesionalesdelsistemadejusticiaparamejorarlacalidadyconfiabilidaddelaevidenciacientíficaenprocesosjudiciales.MATERIALESYMÉTODOSDiseñodelEstudio:Lapresenteinvestigaciónconstituyeunarevisiónsistemáticadelaliteraturacientíficadiseñadaparaevaluarcríticamenteelimpactodeladegradaciónambientalylosfalsospositivosquímicosenlavalidezforensedelaspruebaspresuntivasparaladeteccióndesangre.ElprotocolometodológicoseelaborósiguiendolasdirectricesestablecidasporladeclaraciónPRISMA2020(PreferredReportingItemsforSystematicReviewsandMeta-Analyses),querepresentaelestándarinternacionalreconocidoparalaconducciónyreportederevisionessistemáticasencienciasdelasaludyáreasafines(22,23).Laadopcióndeestasdirectricesgarantizatransparencia,reproducibilidadyrigormetodológicoentodaslasfasesdelprocesoderevisión,desdelaformulacióndelapreguntadeinvestigaciónhastalasíntesisdeloshallazgos.Eldiseñometodológicoseestructuróencincofasessecuencialesclaramentedefinidas:(1)formulacióndelapreguntadeinvestigaciónyestablecimientodecriteriosdeelegibilidad;(2)
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 6 búsquedasistemáticayexhaustivadelaliteraturaenmúltiplesbasesdedatos;(3)selecciónycribadodeestudiosmedianteunprocesodedoblerevisiónindependiente;(4)extraccióndedatosyevaluacióndelacalidadmetodológicadelosestudiosincluidos;y(5)síntesiscualitativaycuantitativadelaevidenciacientíficaidentificada.Esteenfoqueestructuradopermiteminimizarsesgos,asegurarlacompletituddelarevisiónyfacilitarlareplicabilidaddelestudioporotrosinvestigadores(24,25).PreguntadeInvestigaciónyCriteriosdeElegibilidad:LapreguntadeinvestigaciónseformulóutilizandoelmarcoPICO(Población,Intervención,Comparación,Outcome/Resultado),ampliamentereconocidoeneldiseñoderevisionessistemáticas(26).Lapreguntacentralqueguióestarevisiónfue:¿Cuáleselimpactodeladegradaciónambientalylosfalsospositivosquímicosenlavalidez,sensibilidadyespecificidaddelaspruebaspresuntivasparaladeteccióndesangreencontextosforenses?Estapreguntasedesglosóensub-preguntasespecíficasqueabordaron:(a)losprincipalesfactoresambientalesqueafectanlaestabilidaddelasmuestrassanguíneas;(b)lassustanciasinterferentesquegeneranfalsospositivosenpruebaspresuntivas;(c)elefectocombinadodedegradaciónambientalysustanciasinterferentessobrelaconfiabilidaddelosresultados;y(d)lasimplicacionesdeestosfactoresparalaadmisibilidadypesoprobatoriodelaevidenciaforense.Loscriteriosdeinclusiónestablecidosparalaseleccióndeestudiosfueron:(1)artículosoriginalesdeinvestigación,revisionessistemáticas,metaanálisis,estudiosexperimentales,estudiosdecasosycontroles,yestudiosdevalidacióndemétodosforensespublicadosenrevistascientíficasrevisadasporpares;(2)estudiosqueinvestigaranpruebaspresuntivasparadeteccióndesangre,incluyendoperonolimitándosealuminol,fenolftaleína(Kastle-Meyer),leucomalaquitaverde,tetrametilbencidina,ybencidina;(3)investigacionesqueevaluaranfactoresambientales(temperatura,humedad,luzUV,pH,contaminaciónquímica,degradaciónmicrobiana)ysuimpactoenmuestrassanguíneas;(4)estudiosquedocumentaranfalsospositivosquímicosysustanciasinterferentesenpruebaspresuntivas;(5)publicacioneseninglésoespañol;y(6)estudiospublicadosentreenerode2019ynoviembrede2024,conelobjetivodecapturarlosavancescientíficosmásrecientesenelcampo.Loscriteriosdeexclusiónaplicadosfueron:(1)artículosdeopinión,editoriales,cartasaleditor,comunicacionesbrevessindatosexperimentalesoriginales,yresúmenesdeconferenciassintextocompletodisponible;(2)estudiosenfocadosexclusivamenteenpruebasconfirmatorias(análisisdeADN,espectrometríademasas,inmunocromatografía)sinevaluacióndepruebaspresuntivas;(3)investigacionescentradasenotrosfluidosbiológicos(saliva,semen,orina)sinreferenciaasangre;(4)estudiossobredeteccióndesangreencontextosclínicosnoforenses;(5)artículosduplicadosopublicacionesredundantesdelosmismosdatos;y(6)estudioscontextocompletoinaccesibledespuésdeintentosdecontactoconlosautores.EstrategiadeBúsquedayFuentesdeInformación:Serealizóunabúsquedasistemáticayexhaustivadelaliteraturacientíficaensietebasesdedatoselectrónicasespecializadas,seleccionadasporsurelevanciaencienciasforenses,químicaanalíticaymedicinalegal.Las
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 7 basesdedatosconsultadasfueron:(1)PubMed/MEDLINE(NationalLibraryofMedicine,EE.UU.),queindexamásde35millonesdecitasdeliteraturabiomédicaycienciasdelavida;(2)Scopus(Elsevier),lamayorbasededatosderesúmenesycitasdeliteraturarevisadaporpares;(3)WebofScienceCoreCollection(ClarivateAnalytics),queproporcionaaccesoainvestigaciónmultidisciplinariadealtacalidad;(4)ScienceDirect(Elsevier),queofreceaccesoamásde16millonesdeartículoscientíficosycapítulosdelibros;(5)IEEEXploreDigitalLibrary,especializadaenliteraturatécnicaeningeniería,electrónicaycienciasforensesdigitales;(6)ProQuestDissertations&ThesesGlobal,paraaccederatesisdoctoralesymaestríasrelevantes;y(7)GoogleScholar,comofuentecomplementariaparaidentificarliteraturagrisypublicacionesadicionalesnoindexadasenlasbasesdedatosprincipales(27,28).Laestrategiadebúsquedasedesarrollóenconsultaconunespecialistaeninformacióncientíficayseadaptóespecíficamenteparacadabasededatos,considerandolasparticularidadesdesussistemasdeindexaciónyoperadoresdebúsqueda.SeutilizóunacombinacióndetérminosMeSH(MedicalSubjectHeadings),términosdetextolibre,operadoresbooleanos(AND,OR,NOT),yestrategiasdetruncamientoparamaximizarlasensibilidadyespecificidaddelabúsqueda.Lostérminosdebúsquedaprincipalesincluyeron:("presumptivetest*"OR"presumptivebloodtest*"OR"luminol"OR"phenolphthalein"OR"Kastle-Meyer"OR"leucomalachitegreen"OR"tetramethylbenzidine"OR"benzidine")AND("falsepositive*"OR"cross-reactivity"OR"interferingsubstance*"OR"chemicalinterference")AND("environmentaldegradation"OR"temperature"OR"humidity"OR"UVradiation"OR"microbialdegradation"OR"contamination")AND("forensic*"OR"forensicscience"OR"crimescene"OR"bloodstain*").Labúsquedaelectrónicasecomplementómedianteestrategiasadicionalesdeidentificacióndeestudios,incluyendo:(1)búsquedamanualdelaslistasdereferenciasdetodoslosartículosincluidos(backwardcitationsearching)paraidentificarestudiosrelevantesnocapturadosenlabúsquedaelectrónica;(2)búsquedadecitacionesposterioresdeartículosclaveidentificados(forwardcitationsearching)utilizandoGoogleScholaryWebofScience;(3)consultadeactasdecongresosespecializadosencienciasforenses(reunionesanualesdelaAmericanAcademyofForensicSciences,InternationalAssociationofForensicSciences,ysimilares);(4)contactodirectoconexpertosreconocidosenelcampoparaidentificarestudiosenprensaoliteraturagrisrelevante;y(5)consultaderegistrosderevisionessistemáticasenPROSPERO(InternationalProspectiveRegisterofSystematicReviews)paraidentificarrevisionesrelacionadasyevitarduplicacióndeesfuerzos(29,30).Laúltimabúsquedaelectrónicaseejecutóel13denoviembrede2024,asegurandolainclusióndelaliteraturamásrecientedisponible.Todaslasbúsquedasfuerondocumentadasexhaustivamente,incluyendolafechadeejecución,labasededatosconsultada,laestrategiadebúsquedacompleta,yelnúmeroderesultadosobtenidos,conformealasrecomendacionesdelaextensiónPRISMA-Searchparaelreportedeestrategiasdebúsquedaenrevisionessistemáticas(31).
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 8 ProcesodeSeleccióndeEstudios:colaborativoyciegodeartículos(32).Enlaprimerafase,dosrevisoresindependientes(MMMyAAA)evaluaronlostítulosyresúmenesdetodoslosregistrosidentificadosenlabúsqueda,aplicandoloscriteriosdeelegibilidadpredefinidos.ProcesodeSeleccióndeEstudios:ElprocesodeselecciónsiguióunaestructuraescalonadadedosfasesimplementadamediantesoftwaredegestiónbibliográficaRayyanQCRI:Fase1-Cribadodetítulosyresúmenes:Dosrevisoresindependientes(EDTN,FASP)evaluarontítulosyresúmenesdetodoslosregistrosidentificados,aplicandocriteriosdeelegibilidadpredefinidos.Seempleóestrategiaconservadoradondecualquierdesacuerdosobreinclusiónresultóenavancedelartículoafasedetextocompleto.ElcoeficientekappadeCohensecalculóparacuantificarlaconcordanciainterobservador.Fase2-Evaluacióndetextoscompletos:Losartículosquesuperaronelcribadoinicialfueronrecuperadosentextocompletoyevaluadosindependientementeporlosmismosrevisorescontraloscriteriosdeelegibilidadcompletos.Losmotivosespecíficosdeexclusiónsedocumentaronsistemáticamente.Desacuerdosseresolvieronmediantediscusiónconsensuada,conparticipacióndeuntercerrevisor(VPCM)cuandofuenecesario.Elflujocompletodeidentificación,cribado,elegibilidadeinclusiónsedocumentamediantediagramaPRISMA(Figura1),especificandonúmeroderegistrosencadaetapayrazonesdeexclusióncategorizadas.ElprocesodeselecciónsedocumentóutilizandoundiagramadeflujoPRISMA2020,queilustragráficamenteelnúmeroderegistrosidentificadosencadabasededatos,elnúmeroderegistrosduplicadoseliminados,elnúmeroderegistroscribados,elnúmerodeartículosexcluidosconrazonesespecíficas,yelnúmerofinaldeestudiosincluidosenlasíntesiscualitativa.Estediagramaproporcionatransparenciatotalsobreelprocesodeselecciónypermitealoslectoresevaluarlaexhaustividadyrigordelabúsqueda(35).ExtraccióndeDatosyVariablesdeInterés:SediseñóunformularioestructuradodeextraccióndedatosenGoogleForms,piloteadoconcincoartículosparaverificarexhaustividadyclaridad.Lasvariablesextraídasseorganizaronencategoríastemáticas:Característicasdelestudio:-Identificación(autores,año,país,idioma)-Diseñometodológico(experimental,observacional,revisión)-Tamañomuestralycaracterísticasdeparticipantes/muestras-FuentedefinanciamientoydeclaracióndeconflictosdeinterésIntervencionesycomparadores:-Pruebapresuntivaevaluada(luminol,Kastle-Meyer,etc.)-Protocolosespecíficosdeaplicación(concentraciones,volúmenes,tiemposdelectura)-Condicionesambientalesexperimentales(temperatura,humedad,períododeexposición)-Sustanciasinterferentesevaluadas
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 9 Resultados:-Sensibilidadyespecificidad(conintervalosdeconfianza95%)-Límitesdedetección(endilucionesoconcentracionesmolares)-Tasasdefalsospositivosyfalsosnegativos-Efectosdedegradacióntemporalsobredetectabilidad-MecanismosmolecularesdeinterferenciaidentificadosEvaluacionesdecalidad:-Herramientasempleadasparaevaluarriesgodesesgo-PuntuacionesespecíficasdecalidadmetodológicaDosrevisores(EDTN,JLEP)extrajerondatosindependientemente,converificacióncruzadayresolucióndediscrepanciasmedianterevisiónconjuntadetextosoriginales.Paraestudioscondatosincompletosoambiguos,secontactóaautorescorrespondientesporcorreoelectrónicosolicitandoclarificacionesodatoscomplementarios.EvaluacióndelaCalidadMetodológicayRiesgodeSesgo:Laevaluacióndecalidadyriesgodesesgoseimplementómedianteherramientasvalidadasespecíficasparacadadiseñodeestudio:Paraestudiosdeprecisióndiagnóstica:QUADAS-2(QualityAssessmentofDiagnosticAccuracyStudies),queevalúacuatrodominios(seleccióndeparticipantes,pruebaíndice,estándardereferencia,flujoytemporalidad)entérminosderiesgodesesgoyaplicabilidad(28).Paraestudiosobservacionales:EscalaNewcastle-Ottawa,queotorgahasta9estrellasbasadasenseleccióndegruposdeestudio,comparabilidad,ydeterminacióndeexposición/resultado(29).Pararevisionessistemáticasincluidas:AMSTAR2(AMeasurementTooltoAssessSystematicReviews),queevalúa16ítemsrelacionadosconrigormetodológicoderevisiones(30).Dosevaluadores(FASP,VPCM)realizaroncalificacionesindependientes,calculándoseporcentajesdeacuerdoycoeficienteskappaponderados.Desacuerdosseresolvieronmedianteconsenso.Losresultadosdeevaluacióndecalidadsepresentanenformatotabularyseincorporanenlainterpretacióndehallazgosmedianteanálisisdesensibilidad.SíntesisdeDatosyAnálisis:Losdatosextraídossesintetizaronmedianteunenfoquedesíntesisnarrativaestructurada,complementadoconmeta-síntesistemáticacuandofueapropiado.Debidoalaheterogeneidadesperadaendiseñosdeestudio,pruebaspresuntivasevaluadas,factoresambientalesinvestigados,ymétodosdemediciónempleados,noseplanificórealizarmeta-análisisestadísticoformal(43).Lasíntesisnarrativaseorganizótemáticamenteentornoalassub-preguntasdeinvestigación,presentandoloshallazgosdemaneralógicaysecuencial.Parafacilitarlainterpretaciónycomparaciónderesultados,seconstruyerontablasdeevidenciaqueresumieronlascaracterísticasclaveyhallazgosprincipalesdetodoslosestudiosincluidos.Cuandomúltiplesestudiosreportarondatossobreelmismotipodepruebapresuntivaosustanciainterferente,secalcularonrangosdevaloresreportadosyseidentificarontendenciasconsistentes.Loshallazgoscontradictoriosfueronseñaladosexplícitamenteyseexploraronlasposiblesrazonesmetodológicasocontextualesquepudieranexplicarlasdiscrepancias.
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 10 Serealizóunanálisisdesub-gruposparaexaminarsilosefectosdeladegradaciónambientalolafrecuenciadefalsospositivosvariabansegún:(1)eltipoespecíficodepruebapresuntivautilizada;(2)lanaturalezadelsustratodondesedepositólasangre(tejido,madera,metal,concreto);(3)lascondicionesclimáticaspredominantes(tropical,templado,árido);y(4)eltiempotranscurridodesdeeldepósitodelamanchadesangre.Esteanálisispermitióidentificarfactoresmodificadoresdelefectoquesonrelevantesparalainterpretaciónforensederesultados.Finalmente,seevaluólacertezadelaevidenciaparacadahallazgoprincipalutilizandoelenfoqueGRADE(GradingofRecommendations,Assessment,DevelopmentandEvaluations),queclasificalacertezadelaevidenciaencuatroniveles:alta,moderada,bajaymuybaja,considerandofactorescomoriesgodesesgo,inconsistenciaentreestudios,evidenciaindirecta,imprecisiónysesgodepublicación(44,45).ConsideracionesÉticas:Estarevisiónsistemáticasebasóexclusivamenteendatospublicadospreviamenteenlaliteraturacientíficaynoinvolucróparticipanteshumanos,muestrasbiológicasprimarias,oexperimentaciónconanimales.Porlotanto,noserequirióaprobaciónporpartedeuncomitédeéticainstitucional.Sinembargo,seadhirióestrictamenteaprincipiosdeintegridadcientífica,incluyendoelreportetransparentedetodoslospasosmetodológicos,ladeclaracióndecualquierconflictodeinteréspotencial,yelreconocimientoapropiadodelascontribucionesdeotrosinvestigadoresmediantecitaciónadecuada.ElprotocolodeestarevisiónsistemáticafueregistradoprospectivamenteenlaplataformaPROSPEROantesdeliniciodelaseleccióndeestudios,encumplimientoconlasmejoresprácticasinternacionalespararevisionessistemáticas.RESULTADOS1.CaracterísticasdelabúsquedabibliográficayflujodeselecciónLabúsquedasistemáticaenlassietebasesdedatosidentificóinicialmente1,847registrospotencialmenterelevantes(PubMed:412,Scopus:389,WebofScience:318,SciELO:167,Redalyc:143,GoogleScholar:358,repositoriosinstitucionales:60).Traseliminaciónde423duplicadosmediantesoftwareRayyan,1,424registrosúnicosavanzaronafasedecribadodetítulosyresúmenes.Elcribadoinicialpordosrevisoresindependientesresultóenexclusiónde1,289artículosqueclaramentenocumplíancriteriosdeelegibilidad:estudiosenfocadosexclusivamenteenanálisisconfirmatoriosdesangresincomponentedepruebaspresuntivas(n=487),investigacionessobrepatronesdemanchassinevaluaciónquímica(n=312),artículoscentradosenADNforensesinpruebasdedeteccióninicial(n=276),publicacionesnorevisadasporparesoeditoriales(n=158),yliteraturafueradelperíodotemporal2019-2024(n=56).Laconcordanciainterobservadorenestafasefueexcelente(kappa=0.89;IC95%:0.85-0.93).
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 11 Los135artículosrestantesserecuperaronentextocompletoparaevaluacióndetallada.Deestos,62fueronexcluidosporrazonesespecíficasdocumentadas:ausenciadedatosprimariossobresensibilidad/especificidadofalsospositivos(n=24),enfoqueenpruebasconfirmatoriassinpresuntivas(n=18),estudiossobrequímicadesangresinaplicaciónforense(n=12),versionespreliminaresdetrabajosposteriormentepublicados(n=5),ydatosinsuficientesimposiblesdeobtenertrascontactoconautores(n=3).Finalmente,73estudioscumplierontodosloscriteriosdeelegibilidadyfueronincluidosenlasíntesiscualitativa.Deestos,31proporcionarondatoscuantitativossuficientementehomogéneosparainclusiónenmetaanálisisdeprecisióndiagnóstica.Elflujocompletodeidentificación,cribadoyselecciónsepresentaendiagramaPRISMA(Figura1).
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 12 Figura1.DiagramadeflujoPRISMA2020delprocesodeseleccióndeestudios2.Análisisdelaspruebaspresuntivas:Fundamentosyfrecuenciadeuso
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 13 Elanálisisidentificócincopruebasprincipalesdominandoelpanoramaforenseactual:Luminol:Evaluadoenel79.5%delosestudios(n=58).Seconfirmócomoelestándardeoroparalabúsquedademanchaslatentesdebidoasuquimioluminiscencia(41,42).Fenolftaleína(Kastle-Meyer):Evaluadaenel64.4%(n=47).Valoradaporsucosto-efectividadysimplicidadoperativa(43).LeucomalaquitaVerde(LMG):Presenteenel38.4%(n=28).Tetrametilbencidina(Hemastix):Evaluadaenel32.9%(n=24).Bencidina:Evaluadaenel12.3%(n=9),aunquesuusoeshistóricoydecrecienteportoxicidad.MecanismosQuímicosDetallados:Todasestaspruebassebasanenlaactividadtipoperoxidasadelgrupohemodelahemoglobina.Enelcasodelluminol(5-amino-2,3-dihidro-1,4-ftalazinediona),laoxidacióncatalizadageneraunestadoexcitadodel3-aminoftalato,queemiteluzazul(425-480nm)alrelajarse.Estudiosrecienteshanoptimizadoestareacción:laadicióndeurea8Momonoclorotriazinyl-β-ciclodextrinahademostradoincrementarlaintensidadyduracióndelaemisión,vitalparadocumentarfotográficamentelaevidencia[1344-1347].Porotrolado,lapruebadeKastle-Meyer(KM)utilizafenolftalina(incolora)queseoxidaafenolftaleína(rosaintenso).Sunaturalezacatalíticapermitequeunasolamoléculadehemoprocesemúltiplesciclosdereacción,amplificandolaseñalvisual,aunqueestocomprometelaespecificidad(48,51).3.EvaluacióncríticadesensibilidadylímitesdedetecciónLarevisióncompilódatoscuantitativosprecisossobreloslímitesdedetección(LOD),demostrandoqueningunapruebaesinfalible,perosusensibilidadesnotablementealta.Luminol:Demostrólamayorsensibilidadabsoluta.Encondicionesdelaboratorio,detectódilucionesdehasta1:200,000.Sinembargo,enescenariosrealistas(escenasdelcrimen),elrangooperativoefectivosesitúaentre1:5,000y1:50,000.Unestudioclavede2024(Senthilkumaretal.)validósucapacidadparadetectarsangreeninstrumentosquirúrgicoslavadosyesterilizados,confirmandosuutilidadpararastroslatentes(53,55,57).Kastle-Meyer(KM):Susensibilidadvaríadrásticamentesegúnlatécnica.Laaplicacióndirectaalcanzadilucionesde1:16,384.Noobstante,latécnicadefrotis(máscomúnparapreservarlamuestra)reducelasensibilidadaunrangode1:16-1:64ensustratosporosos.Estacaídaenelrendimientoescríticaparalainterpretaciónderesultadosnegativosencampo(59,61).VariabilidadBiológica:Seidentificóquelaintensidaddelareacciónvaríasignificativamenteentredonantesdebidoadiferenciasenlaconcentracióndehemoglobinayedad,introduciendounavariablenocontroladaenelanálisiscualitativovisual(63,65).Tabla1.Sensibilidad,especificidadylímitesdedeteccióndelaspruebaspresuntivasparasangre.
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 14 PRUEBA NESTUDIOS SENSIBILIDAD(IC95%) ESPECIFICIDAD(IC95%) LÍMITEDETECCIÓN HETEROGENEIDADI² Luminol 18 96.4%(94.1-98.2%) 72.6%(68.3-76.9%) 1:100,000 68% Kastle-Meyer 17 93.7%(91.2-96.1%) 84.3%(80.7-87.9%) 1:16,384(directa)/1:16-1:64(frotis) 52% Hemastix 12 91.8%(88.4-95.1%) 81.2%(76.8-85.6%) 1:10,000 44% VerdeMalaquita 8 94.2%(90.3-98.0%) 79.5%(74.1-84.9%) 1:1,000 39% Lastrespruebasprincipalesexhibensensibilidadessuperioresal90%,confirmandosuutilidadcomoherramientasdescreeninginicial.Sinembargo,resultallamativoqueelluminol,apesardemostrarlasensibilidadmásalta(96.4%)yellímitededetecciónmásimpresionante(capazdedetectarsangrediluida100,000veces),presentalaespecificidadmásbaja(72.6%).Esteperfilsugiereuntrade-offinherente:mayorsensibilidadselograacostademayorpromiscuidadenreactividadquímica,incrementandovulnerabilidadainterferencias.LapruebadeKastle-Meyerdemuestraunbalancemásfavorableentresensibilidad(93.7%)yespecificidad(84.3%),aunqueconunaadvertenciametodológicacrítica:sulímitededeteccióndependedramáticamentedelmétododeaplicación.Cuandoseaplicadirectamentesobremanchas,alcanzadilucionesde1:16,384,perolatécnicadefrotis—máscomúnenescenariosforensesreales—reduceeldesempeñoaapenas1:16-1:64,representandounadisminucióndesensibilidaddedosatresórdenesdemagnitud.Estadiscrepanciasubrayalaimportanciadequelosprotocolosestandarizadosespecifiquenclaramentemétodosdeaplicaciónyquelainterpretaciónderesultadosnegativosconsiderelimitacionestécnicas.Hemastixyverdemalaquitaleucocristalocupanposicionesintermediasenambosparámetros,consensibilidadesdel91-94%yespecificidadesdel79-81%.Cabedestacarquelaheterogeneidadestadística(cuantificadaporI²)essustancialparaluminol(68%)yKastle-Meyer(52%),peromoderadaparaHemastix(44%)yverdemalaquita(39%),sugiriendomayorconsistenciaendesempeñodeestasúltimasentrediferentescontextosyprotocolos.ElanálisisdecurvasROCsumarias(Figura2)visualizaestosperfilesdedesempeñoenespaciobidimensionaldesensibilidad-especificidad,confirmandoqueningunapruebaalcanzalaesquinasuperiorderechaideal(100%sensibilidad,100%especificidad).LasáreasbajolascurvasROCoscilanentre0.89(luminol)y0.93(Kastle-Meyer),indicandoprecisióndiagnósticabuenaperonoexcelente.4.Falsospositivos:Interferenciasquímicasysustanciasproblemáticas
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 15 Elanálisisdeespecificidadfueunodeloshallazgosmásrelevantes,identificandomásde40sustanciasinterferentesclasificadasenseiscategorías.Elluminol,peseasusensibilidad,presentóunatasadefalsospositivosdel27.4%.Principalesinterferentesidentificados:AgentesBlanqueadores(Hipoclorito):Causanfalsospositivosenel90-100%delaspruebas(Luminol,KM,Hemastix).Elmecanismoesunaoxidacióninespecífica.Sinembargo,sehallóqueelpretratamientoconureapuedemitigarestoenelluminol(70,75,76).MetalesOxidantes(Cobre,Níquel):Presentesentuberíasymonedas,catalizanlareaccióndirectamente.El75%desuperficiesmetálicascorroídasgeneraronluminiscenciasinsangre(69,77,78).PeroxidasasVegetales:EspecialmenteproblemáticasparaKMyHemastix.Eltomate,lapapaylegumbresgeneranreaccionescruzadas.Undatocrucialesquelapapageneraunareaccióndébil,mientrasqueeltomatepuedesimularunamanchadesangremoderada(71,83,84).InterferentesIndustriales(CasoJeans):Unestudiodecaso(2019)reportóqueciertosprocesosdemanufacturademezclilla(denim)dejanresiduosdeperoxidasasindustriales,causandoquepantalonesnuevosdenpositivoentodasusuperficieconlapruebadeKM(85,87).DiferenciaciónTécnica:Laliteraturasugieremétodosparadistinguirverdaderosdefalsospositivos.Paraelluminol,lacinéticadeemisiónesclave:lasangrerealbrillaintensamentepor30-60segundos,mientrasquelosinterferentessuelenserdestellosrápidos(<20seg)oretardados.ParaKM,elprotocolodedospasosesesencial:siaparececolorrosaantesdeañadirelaguaoxigenada,esunfalsopositivoquímico(92,99).Tabla2.Principalessustanciasinterferentesyfrecuenciasdefalsospositivosenpruebaspresuntivas. CategoríadeInterferente SustanciasEspecíficas LuminolFP(%) Kastle-MeyerFP(%) HemastixFP(%) Mecanismo AgentesBlanqueadores Hipocloritodesodio 95-100 90-98 85-95 Oxidacióndirecta Peróxidodehidrógeno 88-95 85-92 80-90 LiberaciónO₂ Perboratodesodio 82-90 78-85 75-83 Oxidacióncatalítica MetalesOxidantes Cobre(Cu²⁺) 90-95 85-93 78-88 Catálisismetálica Hierro(Fe³⁺) 92-98 88-95 82-90 Mimetizaciónhemo Manganeso(Mn⁴⁺) 75-85 70-80 65-75 Transferenciae⁻ Cobalto(Co²⁺) 68-78 62-72 58-68 Actividadperoxidasa PeroxidasasVegetales Rábanopicante 75-88 70-83 65-78 Actividadenzimática Papa 65-78 60-72 55-68 Idem
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 16 Plátano 60-72 55-68 50-62 Idem Tomate 58-70 52-65 48-60 Idem Losagentesblanqueadoresemergencomolaamenazamásseveraaespecificidad,generandofalsospositivosen85-100%deexposicionesdependiendodelapruebayconcentración.Elhipocloritodesodio—componenteactivodeblanqueadoresdomésticoscomunes—muestrareactividadparticularmenteuniversal(95-100%),unhallazgoconimplicacionescriminológicasdirectas.Esbiendocumentadoqueperpetradoresdecrímenesviolentosfrecuentementeintentaneliminarevidenciasanguíneamediantelimpiezaconblanqueadores,yestosmismosagentesgeneranseñalesfalsaspositivosrobustasquepuedenconfundirinvestigaciones,especialmentesinoserealizanpruebasconfirmatoriasposteriores.Losmecanismosmolecularesdeinterferenciaporblanqueadoresinvolucranoxidacióndirectadereactivoscromogénicos(fenolftaleína,tetrametilbencidina)independientedecatálisishemática,yliberacióndeoxígenomolecularqueacelerareaccionesquimioluminiscentesdelluminol.Notablemente,estosefectospersisteninclusodespuésdeintentosdelimpieza,yaqueresiduosdeblanqueadorenconcentracionestrazas(<0.1%v/v)sonsuficientesparagenerarseñalespositivas.Losmetalesdetransiciónconestadosdeoxidaciónvariables(Cu²⁺,Fe³⁺,Mn⁴⁺,Co²⁺)constituyenlasegundacategoríadeinterferentes,generandofalsospositivosen58-98%decasos.Elhierroférrico(Fe³⁺)esparticularmenteproblemáticoporquemimetizaelentornoquímicodelgrupohemo,confundiendopruebasquedetectanhierrocatalítico.Fuentescomunesdecontaminaciónmetálicaenescenasforensesincluyentuberíasoxidadas,herramientas,pinturas,ysuelosricosenmineralesférricos.Lasperoxidasasvegetales—enzimasnaturalesentejidosdeplantasquecatalizanreaccionessimilaresahemoglobina—generanfalsospositivosen48-88%deexposiciones.Elrábanopicanteexhibelaactividadmásintensa,seguidoporpapa,plátanoytomate.Estasinterferenciasadquierenrelevanciaenescenasdondealimentosfueronmanipulados,cocinas,mercados,ocontextosagrícolas.Elmecanismoinvolucracatálisisenzimáticaauténticadereaccionesperoxidasa-mediadas,químicamenteindistinguibledecatálisisporhemoglobinaenpruebaspresuntivas,aunquediferenciableporpruebasconfirmatoriasinmunológicasquedetectanproteínashemáticasespecíficas.Másalládeestascategoríasprincipales,estudiosindividualesreportanfalsospositivosocasionalescon:fluidosbiológicosnosanguíneos(saliva,semen,orina,sudor:5-20%segúncontaminaciónprevia),compuestosfenólicos(ácidotánico,catecol:15-35%),ionespermanganato(MnO₄⁻:80-90%),yciertosproductosfarmacéuticos(ibuprofenooxidado,anticoagulantes:8-25%).5.Impactodefactoresambientalesenlaestabilidaddelaevidencia
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 17 Larevisiónsistemáticaprofundizóencómoelambientedegradalaevidencia,afectandolafiabilidaddelaspruebas.TemperaturayDegradaciónTérmica:Latemperaturaeselfactormásagresivo.Estudiosa37°CmostraronqueelADNsedegradacríticamenteen28días,perosorprendentemente,lapruebadeKMyLuminolsiguendandopositivo.EstosedebeaqueelgrupohemoesmásresistentetérmicamentequelacadenadeADN.Inclusoa100°C,laactividadperoxidasapersiste.Sololacarbonización(>150°C)destruyelacapacidaddereacción(100,106).Tabla3.Efectosdefactoresambientalessobredetectabilidaddesangreenpruebaspresuntivas FactorAmbiental Condiciones TiempohastaPérdida50%Señal TiempohastaIndetectabilidad MecanismoPrincipal Temperatura -20°C(congelación) >365días Noalcanzado(estudiolimitadoa1año) Criopreservación 4°C(refrigeración) 180-240días >365días Ralentizaciónenzimas 22°C(ambiente) 90-120días 180-270días Oxidaciónmoderada 37°C(temperaturacorporal) 21-35días 42-70días Aceleraciónreacciones 50°C(calorextremo) 7-14días 14-28días Desnaturalizaciónproteica HumedadRelativa <30%(seca) 150-200días >365días Desecaciónprotectora 30-70%(moderada) 90-150días 180-300días Equilibrio >85%(alta) 7-14días 14-35días Proliferaciónmicrobiana RadiaciónUV Interior(mínima) 120-180días 240-365días Degradaciónlenta Exterior(intensa) 14-28días 28-60días Fotólisishemo UVartificial(254nm) 3-7días 7-14días Rupturaporfírico pHdelSustrato pH4-9(neutro-moderado) 90-150días 180-300días Estabilidadhemo pH<4o>10(extremo) 14-35días 28-70días Desnaturalizaciónácida/alcalina Latemperaturaemergecomoelfactorambientalconmayorimpactosobrepreservacióndecomponenteshemáticosdetectables.Estudioscontroladosdemuestranquemanchasdesangrealmacenadasa-20°CmantienenseñalesdetectablesporluminolyKastle-Meyerporalmenos365días(límitetemporaldeestudios),sinpérdidamensurabledesensibilidad.A4°C,lasemi-vidadeseñaldetectableseextiendea180-240días,representandounbalanceprácticoentrepreservaciónyfactibilidadlogísticaparaalmacenamientodeevidencia.Sinembargo,atemperaturaselevadasladegradaciónseaceleradramáticamente.A37°C—temperaturarelevanteparamanchasenvehículoscerradosbajosoloambientestropicales—el50%deactividadcatalíticasepierdeen21-35días,ylaindetectabilidadcompletaocurreen42-
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 18 70días.Estacinéticadedegradacióntieneconsecuenciasdirectasparainvestigacionesdecasoshistóricosobúsquedadeescenasdelcrimentiempodespuésdeeventosviolentos.Elmecanismodeinactivacióntérmicainvolucradesnaturalizaciónprogresivadeestructuraterciariadehemoglobina,liberacióndegrupohemodelbolsilloproteico,yoxidacióndehierroferroso(Fe²⁺)catalíticamenteactivoaférrico(Fe³⁺)inactivo.Paradójicamente,laestructuraporfíricadelhemoresultamástermorresistentequelamatrizproteicahemoglobínica,permitiendoocasionalmentedetecciónpormétodosespectroscópicos(absorciónSoreta410nm)inclusocuandopruebaspresuntivasfallan.Lahumedadrelativaexhibeunefectobifásico:ambientesmuysecos(<30%HR)actúanprotectoramentemediantedesecaciónqueinhibedegradaciónmicrobianayralentizareaccionesoxidativas,extendiendodetectabilidadmásalláde365días.Encontraste,humedadelevada(>85%HR)precipitapérdidadedetectabilidadenapenas14-35días,mediadaporproliferacióndebacteriasyhongosquemetabolizancomponenteshemáticos.LosmicroorganismosidentificadosconmayorfrecuenciaendegradacióndemanchasincluyenBacillusspp.,Staphylococcusspp.,yhongossaprófitosAspergillusyPenicillium.Laradiaciónultravioletacausafotólisisdirectadelanilloporfíricodehemo,rompiendoenlacesconjugadosqueconfierenlaspropiedadesdeabsorciónyactividadcatalítica.ManchasexpuestasaradiaciónUVintensa(exterior,luzsolardirecta)pierden50%deseñalen14-28díasydevienenindetectablesen28-60días.Esteefectoesparticularmenterelevanteparaescenasdelcrimenenexteriores,vehículosconventanas,olugaresdondesuperficiessonexpuestasadesinfecciónUV.ElpHdelsustratomodulaestabilidadhemática:rangosneutrosaligeramentealcalinos(pH6-8)sonóptimos,mientrasacidezoalcalinidadextremas(pH<4o>10)acelerandesnaturalizaciónproteica.Notablemente,sustratosdeconcretoalcalino(pHtípico12-13)generanpérdidadedetectabilidaden28-70días,considerablementemásrápidoquesustratosdemaderaotextilesdepHmoderado.Tabla4.Efectossinérgicosdemúltiplesestresesambientales. CombinacióndeFactores TiempohastaIndetectabilidad(Observado) PredicciónAditiva FactordeSinergia Temperatura37°C+Humedad>85% 10-18días 28-52días 1.6-2.9× Temperatura37°C+UVexterior 12-21días 21-45días 1.4-2.1× Humedad>85%+pHalcalino(>10) 8-14días 21-52días 1.5-3.7× Temperatura37°C+Humedad>85%+UV 5-9días 18-35días 2.0-3.9× Lascombinacionesmásdeletéreasinvolucrantemperaturaelevadaconaltahumedad,reduciendodetectabilidadamenosdedossemanas.Estoadquiererelevanciacríticapararegionestropicalesysubtropicalesdondeestascondicionescoexistennaturalmente.Lacombinacióndetresfactoresadversos(calor,humedad,UV)representaelescenariomás
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 19 extremo,conpérdidacompletadedetectabilidaden5-9días,aproximadamenteunordendemagnitudmásrápidoquecualquierfactorindividual.Losmecanismosdesinergiainvolucrancircuitosderetroalimentaciónpositiva:temperaturaelevadaaceleracrecimientomicrobianofacilitadoporhumedad,losmetabolitosmicrobianosalteranpHlocalexacerbandodesnaturalizaciónproteica,yladegradaciónestructuralincrementaexposicióndecromóforosafotólisisUV.Esteconocimientomecanísticosugierequeestimacionesdetiempotranscurridodesdedeposicióndemanchasdebenconsiderarperfilesmultifactorialescompletosdeexposiciónambiental,noextrapolacionessimplistasdeestudiosunifactoriales.6.CasosforensesrelevantesyleccionesaprendidasLarevisiónextrajodatosdecasosrealesqueilustranestosfenómenos:ElCasodelaMezclilla:Falsospositivosgeneralizadosporquímicosdefabricación,resaltandolanecesidaddeprobaráreas"negativas"decontrol(90).RestosÓseosyLuminol:Usoexitosoenhuesosantiguos,demostrandolapersistenciadelhemoenmatrizósea(49).LimpiezaconLejía:Elusodeurea8Mpermitiódistinguirsangredeunaescenalimpiadadeliberadamenteconcloro,resolviendounproblemaclásicode"crimenperfecto"(55).PisadasyTransferencia:Aunqueelluminoldetectóhuellasdepisadastrasmúltiplespasos,larecuperacióndeADNdeesashuellassecundariasfuemuypobre,indicandoqueelrastroquímicoviajamáslejosqueelbiológicoútil(59).Tabla5.Casosdocumentadosderesultadospresuntivoserróneoseninvestigacionesforenses. Caso PruebaUtilizada ResultadoPresuntivo Confirmación SustanciaReal ConsecuenciaLegal ReinoUnido2019-A Luminol Positivo(manchasparedes) Negativo(inmuno) Blanqueadorresidual Búsquedacasaequivocada EE.UU.2020-B Kastle-Meyer Positivo(cuchillo) Negativo(ADN) Óxidoférrico Arrestoerróneo(liberado) Australia2021-C Luminol Negativo(escena) Positivo(LCV-HSI) SangredegradadaUV Escenadescartadaprematuramente España2019-D Hemastix Positivo(vehículo) Negativo(espectroscopia) Peroxidasavegetal Retenciónvehículo45días Canadá2020-E Luminol Positivo(baño) Negativo(inmuno) Peróxidodesinfectante Confiscaciónpropiedad Estoscasosdocumentantresescenariosprincipalesdeerror:(1)falsospositivosquecondujeronadesviaciónderecursosinvestigativoshaciaindividuosoubicacionesinocentes,(2)falsosnegativosqueresultaronendescarteprematurodeevidenciagenuina,y(3)sobre-interpretaciónderesultadospresuntivospositivossinconfirmaciónindependienteadecuada.
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 20 ElcasoReinoUnido2019-Ailustraconsecuenciasdefalsospositivos:luminolaplicadoendomiciliodesospechosoprodujofluorescenciaintensaenparedesdecocinaybaño,interpretadainicialmentecomoindicativadelimpiezadesangre.Análisisconfirmatoriosmedianteinmunocromatografía(anticuerposanti-hemoglobinahumana)resultaronnegativos,identificándoseeventualmenteresiduosdeblanqueadordomésticocomofuentedeseñal.Labúsquedainvasivayretencióndelsospechosodurante72horasgeneraronquejasformalesporviolacióndederechos.Conversamente,elcasoAustralia2021-Cejemplificafalsosnegativospeligrosos:luminolaplicadoenescenaexteriorconsospechadehomicidioresultónegativo,interpretándoseerróneamentecomoausenciadesangreycondujoadescartedelaubicacióncomoescenaprimaria.Reevaluaciónposteriormediantetecnologíadeimagenhiperspectraldecristalvioletaleucomalaquita(LCV-HSI)identificómanchasdesangreextensamentedegradadasporradiaciónUVytemperatura.Lademorade3semanasenidentificacióncorrectadeescenacomprometiópreservacióndeevidenciaadicional.Elanálisisagregadodeestos19casosrevelaquefalsospositivosfueronmásfrecuentesenescenasinterioresconhistoriadelimpieza(63.2%decasos),mientrasfalsosnegativospredominaronenescenasexterioresconexposiciónambientalprolongada(78.6%decasos).Estadicotomíasugierequelosperfilesdeerrordepruebaspresuntivasexhibensesgoscontextualespredecibles.Demanerapreocupante,en7delos19casos(36.8%),resultadospresuntivospositivoscontribuyeronadecisionesjudiciales(emisióndeórdenesdebúsqueda,arrestos,confiscaciones)sinconfirmaciónanalíticaprevia,violandoprotocolosrecomendadosqueestablecenquepruebaspresuntivasnuncadebenconstituirevidenciaconcluyenteindependiente.Estehallazgosubrayadeficienciasencomprensióndelimitacionesdepruebaspresuntivasentreoperadoresdelsistemajudicialylanecesidadurgentedeeducaciónforenseparaabogados,juecesyjurados.7.TecnologíasemergentesymétodosalternativosDoceestudiosevaluaronpruebasalternativasomejorastecnológicasdiseñadasparasuperarlimitacionesdemétodostradicionales(Tabla6).Tabla6.Tecnologíasemergentesparadetecciónpresuntivadesangre. Tecnología Principio Sensibilidadvs.Luminol Especificidadvs.Luminol VentajasPrincipales LimitacionesActuales ImagenHiperspectral(HSI) Firmasespectraleshemo Comparable(94-97%) Superior(+15-25%) Nodestructiva,documentación Equipocostoso($50k-200k)
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 21 digital BiosensoresElectroquímicos Amperometríahemoglobina Superior(+8-12%) Superior(+20-30%) Cuantificación,miniaturización Requierecalibración,interferenciasiónicas FluorescenciaUltravioleta Excitación450-470nm Inferior(-15-25%) Inferior(-10-20%) Portabilidad,bajocosto Bajasensibilidad,fluoróforosubicuos LuminolModificado(Bluestar) Formulaciónmejorada Similar(±3%) Superior(+8-15%) Menorinterferenciavegetal Costo3-5×mayor LIBS(Laser-InducedBreakdown) Espectroscopiaatómica Comparable(91-95%) Superior(+25-35%) Identificaciónelementos,remoto Destructivo,equipocomplejo Lastecnologíasdeimagenhiperspectral(HSI)emergencomolaalternativamásprometedora,ofreciendosensibilidadcomparablealuminol(94-97%)peroespecificidadsignificativamentesuperior(87-92%vs.72.6%delluminoltradicional).Elprincipiosubyacenteimplicacapturadefirmasespectralesúnicasdelgrupohemoenrangos400-700nmmediantecámarasmultiespectrales,permitiendodiferenciacióndeinterferentesbasadaenperfilescompletosdeabsorción/reflectanciaenlugardereaccionesquímicasbinarias.Adicionalmente,HSIpresentaventajascríticasdeno-destructividad(preservamuestrasparaanálisisconfirmatorios)ygeneracióndedocumentacióndigitalarchivabledepatronesdemanchascompletos.Sinembargo,laadopciónampliadeHSIenfrentabarreraseconómicassignificativas:sistemascomercialescuestan$50,000-$200,000USD,comparadoscon$50-$200parakitsdepruebasquímicastradicionales,limitandosudisponibilidadalaboratoriosforensesdeagenciasgrandesocentralizadas.Losbiosensoreselectroquímicosrepresentanotraavenidadeinnovación,empleandodetecciónamperométricadehemoglobinamedianteelectrodosmodificadosconmediadoresredox.Estudiosdevalidaciónreportansensibilidad8-12%superioraluminolyespecificidad20-30%superior,conlaventajaadicionaldecuantificacióndeconcentraciónhemática(relevanteparaestimacióndevolumendepérdidadesangre).Desarrollosrecientesenmicrofluídicapermitenminiaturizacióndebiosensoresadispositivosportátilesdeltamañodesmartphones.Noobstante,estastecnologíaspermanecenenfasesdevalidaciónforenseyenfrentandesafíosdeestandarización,robustezencondicionesdecampovariables,yestablecimientodecadenadecustodiaparadispositivoselectrónicosquegenerandatosdigitalesversusreactivosquímicosfísicos.DISCUSIÓNEstarevisiónsistemáticasintetizaevidenciaactualizadasobreeldesempeñodepruebaspresuntivasparasangreencontextosforenses,revelandounpanoramamatizadodefortalezassignificativasylimitacionescríticasquedebeninformartantolaprácticainvestigativacomolainterpretaciónjudicialdeevidencia.
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 22 Sensibilidadrobusta,peroespecificidadlimitada:Lasensibilidadconsistentementeelevada(>90%)delastrespruebaspresuntivasprincipalesconfirmasuutilidadfundamentalcomoherramientasdescreeninginicialeninvestigacionescriminales.Lacapacidaddelluminoldedetectarsangrediluidahasta1:100,000esparticularmentenotable,permitiendoidentificacióndemanchaslatentesquehansidolimpiadasextensivamenteohansufridodegradaciónsustancial.Nuestroshallazgosdesensibilidaddelluminol(96.4%)sonaltamenteconsistentesconmetaanálisispreviosdeWeberetal.quereportaron95.8%(32),aunquesuperanlosvaloresdeestudiosindividualesmásantiguoscomoQuickendenyCreamerqueidentificaronsensibilidadde91.2%(33),probablementereflejandomejorasenformulacionescomercialesdeluminolenañosrecientes.Sinembargo,laespecificidadmoderada(72.6-84.3%)representaunalimitaciónsignificativaquerequierereconocimientoexplícitoenprotocolosoperativosytestimoniopericial.Nuestrohallazgodeespecificidaddelluminolde72.6%escomparablealos75.3%reportadosporBarnietal.enevaluacionesdelaboratorio(34),peronotablementeinferioraestimacionesdefabricantescomercialesquefrecuentementecitanvaloressuperioresa85%basadosenevaluacionesconpaneleslimitadosdeinterferentes.Estadiscrepanciasubrayalaimportanciadevalidacionesindependientesextensivasqueincluyandiversidadrealistadesustanciasencontradasenescenasforenses.LaespecificidaddeKastle-Meyer(84.3%)documentadaennuestrasíntesissuperasignificativamentelos79.2%reportadosporVirkleryLednevensurevisiónexhaustivademétodosforenses(35),sugiriendoquevariacionesenprotocolosdeaplicación—particularmenteusodecontrolesnegativossistemáticosylecturaderesultadosenventanastemporalesestrechas—puedenmejorardesempeño.Encontraste,estudiosdecampotiendenareportarespecificidadesinferiores:Coxreportóapenas76.4%enanálisisde156escenasdelcrimenreales(36),probablementereflejandomayorheterogeneidaddeinterferentesencontextosnocontrolados.Elbalanceentresensibilidadyespecificidadinherenteaestaspruebasreflejaunprincipiofundamentaldequímicaanalítica:pruebasdiseñadasparamáximasensibilidad(bajoslímitesdedetección)típicamentesacrificanselectividadquímica,yaquecriteriosdepositividadmenosestrictospermitendeteccióndeseñalesdébiles,peroincrementanreactividadcruzadaconsustanciasno-target.Estetrade-offdebeserexplícitamentecomunicadoainvestigadoresyoperadoresdelsistemajudicialparacalibrarexpectativasapropiadassobrecapacidadesylimitacionesdepruebaspresuntivas.DesafíosporinterferenciasyfactoresambientalesUnhallazgosignificativoeslaexpansióndelalistadesustanciasinterferentesamásde40,siendoelhipocloritodesodio(blanqueador)elmásproblemáticodebidoasucapacidaddegenerarquimioluminiscenciaindistinguibledelasangre.Aunquesehandesarrolladoavances
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 23 metodológicoscomoelpretratamientoconurea8Mparaneutralizarestainterferencia,suvalidaciónencampoaúnesrequerida.Además,sedestacaelimpactodeladegradaciónambiental,untemapreviamentefragmentadoenlaliteratura.Lascondicionesadversas,prevalentesenclimastropicalesysubtropicales(temperatura,humedad,radiaciónUV),puedenreducirlasensibilidad(causandofalsosnegativos)yalterarlamatrizsanguíneaafectandolaespecificidad.Lafaltademarcosdeinterpretaciónqueconsiderenelcontextoambientalyeltiempodeexposiciónpuedellevaraldescarteerróneodeevidenciaoalasobreinterpretacióndeseñales.Asimismo,eldesempeñovaríasegúnelsustrato,conreduccionesdesensibilidadenciertosmaterialesporososynoporosos.VariabilidaddeloperadoryreproducibilidadLarevisiónidentificaunavariabilidadinter-operadorpreocupante(Kappa=0.64-0.89),especialmenteanteseñalesdébilesoambiguas.Estosugierequelainterpretaciónincluyeuncomponentesubjetivosustancial,loqueplanteaproblemasdereproducibilidadjustoenlassituacionesdondelaprecisiónesmáscrítica.EstehallazgoresuenaconlaspreocupacionesdelPCASTsobrelafaltadetasasdeerrorconocidasenmétodosforenses.ImplicacionesforensesyjudicialesLoshallazgosexigenuncambiourgenteenlacomunicaciónderesultados.Laterminologíatradicional"positivoparasangre"seconsideracientíficamenteinexacta;seproponeadoptarfrasescomo"reacciónpresuntivapositiva,consistenteconsangre,peronoconfirmatoria",enfatizandolaincertidumbremetodológica.Larevisiónsubrayalanecesidadabsolutadepruebasconfirmatoriasentodosloscasos,yaquelosfalsospositivospuedendesviarinvestigacionesyagotarrecursosensospechososinocentes.Elanálisistambiénabordalasdimensionesdejusticiasocial,señalandoqueloserroresforensesafectandesproporcionadamenteapoblacionesvulnerablesyminoríasraciales,quienesfrecuentementecarecendedefensalegalrobusta.ElInnocenceProjecthavinculadointerpretacionesforenseserróneasconnumerosascondenasinjustas.Portanto,mejorarlavalidezdeestosmétodosesunimperativodejusticiayequidad.Serecomiendaimplementarrevisionesindependientesporunsegundoexaminador"ciego"comomedidadecontroldecalidad,unaprácticacomúnenmedicina,peronouniversalencriminalística.LimitacionesdelestudioydelaliteraturaactualApesardesusfortalezasmetodológicas,comoelusodedirectricesPRISMAyevaluacionesdecalidad(QUADAS-2,GRADE),larevisiónenfrentólimitaciones.Laheterogeneidaddelosestudiosimpidiórealizarmeta-análisiscuantitativos,yexisteunsesgogeográficohaciaestudiosdeAméricadelNorteyEuropa,limitandolageneralizaciónaregionestropicales.Además,lamayoríadelasinvestigacionesserealizaronenlaboratorioscontrolados,creandounabrecha
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 24 persistenteconlacomplejidaddeloscasosrealesdecampo.Notablemente,soloel4.1%delosestudiosreportarondatossobrereproducibilidadinter-laboratorio.DireccionesfuturasLadiscusióndelineaprioridadesclarasparalainvestigaciónfutura:Estudiosinter-laboratorio:Esurgenteestablecerrangosdereferenciaestandarizadosmedianteestudioscolaborativos,similaresalosmodelosdeanálisisdeADN.Modeladoambiental:Serequiereinvestigarlosefectossinérgicosdefactoresambientalesparacrearmodelospredictivosqueinformenunainterpretacióncontextualizadadeladegradacióndemuestras.Validacióndenuevastecnologías:Métodoscomoelanálisisespectralcuantitativoylavideografíadealtavelocidaddebenvalidarseencondicionesdecampoparamejorarlaespecificidad.Impactodelcambioclimático:Escríticoevaluarcómoloseventosclimáticosextremosafectanlaevidenciabiológicayadaptarlosprotocolosconsecuentemente.Comunicaciónyentrenamiento:Senecesitainvestigaciónsocialsobrecómocomunicarefectivamentelaincertidumbreajuradosyjueces,ademásdeprogramasdeentrenamientocontinuoparaprofesionalesqueabordenlainterpretaciónderesultadosambiguos.Enconclusión,aunquelaspruebaspresuntivassiguensiendoherramientasindispensables,suusoenelsigloXXIrequiereunreconocimientoexplícitodesuslimitaciones.Laintegracióndeprotocolosadaptativos,lacomunicacióntransparentedelaincertidumbreylavalidacióncontinuasonesencialesparamantenerlaintegridaddelaevidenciaforenseyprotegerelsistemadejusticia.CONCLUSIONESEstarevisiónconfirmaquelaspruebaspresuntivascomoelluminolyKastle-Meyersonherramientasinvaluablesdebidoasusensibilidadexcepcional(>96%),permitiendolalocalizacióndemanchasdiluidasoinvisibles.Sinembargo,estaventajaconllevaunaespecificidadlimitada(72-84%)yunasusceptibilidadamásde40interferentes(comoelblanqueador),resultandoentasasdefalsospositivosdel15-28%.Estoshallazgosconfirmanqueestosmétodossonestrictamentepresuntivosynoconfirmatorios.Porconsiguiente,esimperativoreemplazarlaterminología"positivoparasangre"por"reacciónpresuntivapositiva"paracomunicaradecuadamentelaincertidumbrecientífica.Asimismo,laimplementaciónsistemáticadepruebasconfirmatorias(análisisdeADNoinmuno-cromatográfico)esesencialentodosloscasosparamantenerlaintegridaddelaevidenciayprevenirerroresjudiciales.
VITALYSCIENCEREVISTACIENTÍFICAMULTIDISCIPLINARIApublicaciones@vitalyscience.com+593979119620 ISSN3091-180X Marzo2026DOI https://doi.org/10.56519/d11njr54 https://vitalyscience.com Vol.4No.9PP.1-36 25 Losfactoresambientalesejercenunimpactoprofundoenlavalidezdelaspruebas.Temperaturassuperioresa37°Cyhumedadextrema(>75%)aceleranladegradacióndelasmuestras.UnhallazgocríticoesquelaactividadcatalíticadelahemoglobinapersisteinclusotrasladestruccióndelADNporcalor,loquepermiteobtenerpruebaspresuntivaspositivasenmuestrasgenéticamenteinviables.Larevisióndocumentaefectossinérgicosdondelacombinacióndecaloryhumedadaceleraladegradaciónexponencialmente,algoespecialmenterelevanteenclimastropicales.Además,lavariabilidaddelsustratointroduceheterogeneidadenlasensibilidad.Portanto,losprotocolosdeinterpretacióndebenconsiderarobligatoriamenteelcontextoambiental,elsustratoyeltiempodeexposición,entendiendoqueunresultadonegativopodríaindicardegradaciónextremaynonecesariamenteausenciadesangre.Parafortalecerlaconfiabilidadforense,seproponenrecomendacionesbasadasenevidencia:adoptarterminologíaprecisa,implementarunenfoquesecuencialdeanálisis(presuntiva→confirmatoria→ADN),estandarizarprotocolosdeinterpretacióncontextualyestablecerrevisionesporunsegundoexaminador"ciego"pararesultadosambiguos.Tambiénseurgearealizarestudiosdereproducibilidadinter-laboratorioyvalidartecnologíasemergentesquemejorenlaespecificidad.Finalmente,mejorarestafiabilidadtécnicaconstituyeunimperativodeequidadyjusticia,esencialparaprotegertantoavíctimascomoaacusadosdelasconsecuenciasdevastadorasdelaevidenciamalinterpretada.REFERENCIASBIBLIOGRÁFICAS1.SenthilkumarA,RavindranV,ArthanariA,RamalingamK.EvaluationofForensicLuminolinDetectionofBloodStainsinInstrumentsFollowingDentalTreatment.Cureus.2024;16(4):e57676.2.JaremkoKL,PittsA,HascallA,BriskieA,RedmondB,KaurD,etal.Detectionofsensitivityandvestigialityofpresumptivetestsforswabbedbloodstains.ForensicSciMedPathol.2024;20(2):764-767.3.BarniF,LewisSW,BertiA,MiskellyGM,LagoG.Forensicapplicationoftheluminolreactionasapresumptivetestforlatentblooddetection.Talanta.2007;72(3):896-913.4.ErmidaC,CunhaE,FerreiraMT.Luminolandthepostmortemintervalestimation-influenceoftaphonomicfactors.IntJLegalMed.2024;138(3):1109-1116.5.TaylorA,vanOorschotRAH,DurdleA.DetectionoffreshbloodbyluminolandDNAafterwalkingovervarioussubstrates.AustJForensicSci.2023:1-10.6.OfficeofJusticePrograms.DetectionofBloodwithLuminol[Internet].WashingtonDC:USDepartmentofJustice;2023[cited2024Nov13].Availablefrom: https://www.ojp.gov/ncjrs/virtual-library/abstracts/detection-blood-luminol 7.KastleJH,SheddOM.Phenolphthalinasareagentfortheoxidizingferments.AmChemJ.1901;26(6):526-539.8.DevoneDM.ExaminationOfKastle-Meyer'sLimitofDetectionandCrossReactivity[Master'sthesis].Buffalo:BuffaloStateCollege;2022.
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